друк

№369 Туберкульоз (Mycobacterium tuberculosis), визначення ДНК

 

Визначення специфічної ділянки ДНК Mycobacterium tuberculosis методом полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) в мокротинні.

Туберкульоз (від лат. Tuberculum - горбик) - поширене, соціально залежне захворювання людини. Хворіють їм і тварини. Збудник туберкульозу відкритий Р. Кохом в 1882 р. Це кислотостійкі аеробні бактерії (74 види) роду mycobacterium, широко поширені в грунті, воді і у тварин. У людини найчастіше збудником є Mycobacterium tuberculosis. Вони дуже стійкі до багатьох факторів зовнішнього середовища, а в організмі дуже довго залишаються життєздатними і можуть викликати захворювання через багато років після зараження. Дуже важливо, що мікобактерії туберкульозу можуть утворювати так звані L-форми. Зберігаючись в організмі, вони створюють протитуберкульозний імунітет. Тривалий час туберкульоз може протікати приховано і виявлятися випадково, хоча нерідко вже проявляються такі симптоми, як слабкість, швидка стомлюваність, субфебрильна температура, нічна пітливість, а в крові - анемія і лейкопенія.

В даний час, незважаючи на всі досягнення антимікробної терапії, туберкульоз загрожує майбутньому нації. Тому всі методи діагностики, особливо його латентних форм є вкрай важливими.

Існує багато методів лабораторної діагностики туберкульозу: мікроскопія мазка (найчастіше для цього використовують мокротиння), класичний культуральний метод, ІФА. Всім їм притаманні гідності, а й певні недоліки, зокрема, виявлення мікобактерій тільки у разі їх достатньої кількості.

В останні роки для діагностики використовують полімеразну ланцюгову реакцію (ПЛР). Її висока чутливість дозволяє виявити в досліджуваному матеріалі поодинокі клітини і навіть їх фрагменти ДНК. Метод виключає перехресні реакції і специфічність досягає 100%. ПЛР дозволяє диференціювати обмежені і дисеміновані форми туберкульозу, особливо у дітей навіть при негативних результатах мікробіологічних досліджень.

Аналітичні показники:

  • визначення специфічної ділянки ДНК Mycobacterium tuberculosis методом полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) в мокроті або плевральної рідини;
  • специфічність визначення - 98%;
  • чутливість визначення не менше 100 днк-копій в 5 мкл проби, що пройшла обробку (виділення ДНК).


Література

  1. Макаревич А.Э. Заболевания органов дыхания – М. Высшая школа, 2000. – 368 с.
  2. Jacobs D. et al. Laboratory test handbook/ Lexi-Comp./2002 - pр. 828 - 829.
Ціна 98 грн.

термін виконання
вказаний термін не включає день взяття біоматеріалу
3 робочих дні
Досліджуваний матеріал
Мокротиння
Метод визначення
ПЛР.
Правила взяття (для лікарів)

Матеріал збирається в стерильну посудину із щільно закручуваною кришкою, без транспортного середовища.

Неохолоджені проби протягом 4-х годин використовуються для виділення ДНК. Якщо немає можливості доставити проби в лабораторію протягом цього часу, то зберігати проби при +2 ... +8 ° С рекомендується не більше 1 доби.

При більш тривалих термінах зберігання і транспортування допускається одноразове заморожування матеріалу та транспортування його при -17 ... -23°С. Матеріал повинен транспортуватися у контейнерах у строго вертикальному положенні.