Тест необхідно проводити строго натщесерце за призначенням лікаря! Протягом 3 днів, що передють аналізу, необхідно дотримуватися звичайної дієти, без обмеження вуглеводів. За 3 дні до проби необхідно скасувати лікарські препарати, вживання яких може вплинути на результат (саліцилати, оральні контрацептиви, тіазиди, кортикостероїди, фентіазин, літій, метапірон, вітамін С), тощо.
Напередодні дослідження протипоказано вживання алкоголю. Тест проводиться вранці натщесерце, після 10-14-годинного голодування (але не більше 16 годин). Під час проведення дослідження заборонено вживати будь-які рідини, окрім води, приймати їжу, курити. Необхідно спокійно лежати чи сидіти. При проведенні проби можливі прояви слабкості, відчуття непритомності, підвищеного потовиділення. В цьому випадку дослідження призупиняється.
У пацієнта, що обстежується, натщесерце проводиться взяття венозної крові для визначення глюкози та С-пептиду, після чого він перорально приймає 75 г глюкози, розчиненої у 250 мл чаю або теплої води. Через дві години після вживання 75 г глюкози проводиться повторне вимірювання рівня глюкози та С-пептиду.